固相分散萃取-液相色谱法测定番茄酱中2-萘酚

采用固相分散萃取 - 高效液相色谱法测定番茄酱中的 2- 萘酚。无水硫酸钠作分散剂、乙腈作萃取剂，考察了 2， 4- 二氯苯氧乙酸存在时的干扰情况。色谱条件： TOSOH C18 色谱柱；甲醇 - 水（体积比50∶50）为流动相；流速： 1.0 mL /min；检测波长： 230 nm。 2- 萘酚在 0.005 μg /mL ~2.00 μg /mL 范围内线性良好，方法检出限为 1 μg /g，平均回收率为 75.0%，相对标准偏差为 3.0%。
近年来，食品安全已成为人们广泛关注的问题。 2- 萘酚是一种食品保鲜剂，具有相当的生物毒性，过量使用可能引起全身中毒，另外可导致肾损伤、腹痛、循环系统等病变。我国（GB2760-2006）规定： 2- 萘酚用于果蔬保鲜的残留量应低于70 mg / kg。因此有必要对其在食品中的含量进行快捷、准确的测定。
文献报道 2- 萘酚的检测方法主要有：紫外可见分光光度法、高效液相色谱法、毛细管电泳方法和荧光光度法。另外， 2， 4- 二氯苯氧乙酸也是一种食品保鲜剂，如果同时存在，有可能干扰 2-萘酚的测定。
本文采用固相分散萃取法处理番茄酱样品，结合高效液相色谱对其中的 2- 萘酚进行了测定，同时考察了 2， 4- 二氯苯氧乙酸存在时的干扰情况。

1 实验部分
1.1 仪器和试剂
岛津 LC-10AT 高效液相色谱仪； SPD-10A 紫外检测器； 7725i 型手动进样阀； N2000 双通道色谱工作站（浙江大学智能信息工程研究所）；岛津UV-265 紫外可见分光光度计。
2- 萘酚（Merck 公司）； 2， 4- 二氯苯氧乙酸（北京化学试剂公司）；甲醇、乙腈为色谱纯；无水硫酸钠为分析纯（300 ℃马弗炉烘烤 2 h）；二次蒸馏水；蕃茄酱购自当地超市。
1.2 色谱条件
色谱柱： TOSOHC18 色谱柱（150mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇 - 水（体积比 50∶50）；流速： 1.0 mL /min；检测波长： 230 nm；柱温： 30 ℃；进样量： 10.0 μL。采用色谱峰保留时间定性，外标法峰面积定量。
1.3 标准溶液配制
储备液：准确称取 2- 萘酚和 2， 4- 二氯苯氧乙酸，乙腈溶解定容，配成质量浓度均为 1 mg /mL的储备液， 4 ℃冰箱存放。
工作溶液：乙腈逐级稀释储备液，配制系列工作溶液。
1.4 样品预处理
准确称取 2.0 g 番茄酱和 11.0 g 无水硫酸钠，于研钵中混合研磨，使番茄酱充分脱水并分散均匀。将研磨好的混合物转入三角瓶中，加入 15 mL乙腈，旋涡震荡 2 min，静置 20 min，倾析上清液至 15 mL 具塞锥形刻度管中。残渣中再加入 3 mL、2 mL 乙腈进行第 2、第 3 次萃取，分别震荡 2 min，静置 5 min，合并萃取液。过滤（滤液总体积为11 mL）。移取适量滤液经 0.45 μm 微孔滤膜过滤，离心后取 10 μL 进样分析。

2 结果与讨论
2.1 色谱条件优化
实验考察了 210 nm~300 nm 范围内 2- 萘酚的响应情况，在 230 nm 处有较强吸收，且杂质峰不干扰，故选 230 nm 作为最佳检测波长。在等度洗脱条件下，不同体积比的甲醇 - 水作为流动相时出峰情况表明：当甲醇 - 水体积比为 50∶50 时，如果2， 4- 二氯苯氧乙酸同时存在，不会干扰 2- 萘酚的测定，其他杂质峰也无干扰。
2.2 分散剂用量
当番茄酱样品量为 2 g 时，分别考察了加入5 g、 7 g、 9 g、 11 g 和 12 g 无水硫酸钠作为分散剂时样品的分散、脱水情况。结果表明，当加入量为11 g 时，样品恰好干燥充分、分散均匀。故选择分散剂的量为 11 g。
2.3 萃取剂的选择
萃取剂的选择对萃取效果有重要影响。本实验分别考察了甲醇和乙腈作为萃取剂时的萃取情况。
结果表明，在最佳色谱条件下，用甲醇萃取时，组分出峰处有杂质峰干扰，影响测定；用乙腈萃取时，回收率较高且无杂质峰干扰。故选择乙腈作为萃取剂。
2.4 萃取次数的影响
本实验考察了 20 mL 乙腈作为萃取剂时，不同萃取次数对回收率的影响。总体积一定时， 3 次萃取的回收率明显高于另外 2 种萃取方法。故采用 20 mL 乙腈分 3 次萃取对样品进行分析。
2.5 线性方程及检出限
移取系列标准工作液，在所选的色谱条件下，以 Y （峰面积）对 X （质量浓度）绘制工作曲线，2- 萘酚在 0.005 μg /mL~2.00 μg /mL 范围内线性良好。
2.6 加标回收率和精密度
在最佳化条件下，考察了 2- 萘酚在番茄酱样品中的加标回收率
2.7 样品测定
在优化的色谱条件下，我们对市售番茄酱样品进行了 3 次平行测定， 2- 萘酚未被检出。

来源：惠合胶体磨研磨设备厂

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