离子色谱测定乳制品中硫氰酸钠含量

摘要：建立了离子色谱测定乳制品中硫氰酸钠含量的方法。采用乙腈沉淀乳制品中蛋白，取上清液稀释10 倍，过 RP 柱去除脂肪后，离子色谱测试，梯度淋洗，外标法定量。在 0.1 mg / L～2.0 mg/ L 范围内，浓度与其峰面积呈良好的线性关系，回归方程为y=0.53x，相关系数（r2） 0.9 996，检出限，为 0.1 mg / L，方法回收率 96.2％～107.7％，RSD＜3.4％。硫氰酸钠是一种白色斜方晶系结晶或粉末，易溶于水、乙醇、丙酮。主要用于化学分析试剂、彩色电影胶片冲洗剂、制药、印染等。国家标准《食品添加剂使用卫生标准》 1986 年版本即GB 2760- 1986 中曾将其列为允许使用的食品添加剂，主要与过氧化氢合用于生牛乳保鲜。1995 年国家颁布实施了国标 GB / T15550- 1995 《活化乳中乳过氧化物酶体系保存生鲜牛乳实施规范》。其后由于其毒性作用，于 GB 2760- 2007 中删除了这一条款。2008 年 12 月，卫生部发布《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂品种名单（批）》，明确规定硫氰酸钠属于违法添加的非食用物质。但是，至今仍有一些不法分子为了谋取利益，不顾国家的法律法规，依旧向牛乳中添加硫氰酸钠，危害消费者的身体健康, 而目前尚无食品中硫氰酸钠检测的国家标准或行业标准。

1 试验部分
1.1 原理
液态奶样品沉淀蛋白、去除脂肪后，用离子色谱分析，电导检测器检测，外标法定量。
1.2 仪器与试剂
1.2.1 仪器
DIONEX ICS- 3000 离子色谱仪,配有氢氧化钾淋洗液发生器、DS6 电导检测器、ASRS- 300 自动再生抑制器；冷冻离心机；固相萃取小柱，OnGuard RP 柱，或相当者（如 C18），使用前依次用 5 mL 甲醇和 10 mL 水活化。
1.2.2 试剂
硫氰酸钠标准品，北京化工厂；乙腈，色谱纯；试验用水为纯水。
硫氰酸钠标准储备液：将硫氰酸钠标准品于80 ℃烘箱内烘干 2 h。准确称取干燥后的硫氰酸钠 1.3 966 g 于 1 000 mL 容量瓶中，定容，混匀，即得 1 000 mg / L 硫氰酸根标准储备液。硫氰酸标准中间液：取硫氰酸根标准储备溶液 1 mL，置于 100 mL 容量瓶中，加水至刻度，此溶液含硫氰酸 10 mg / L。
硫氰酸标准使用液：移取 0.1 mL、0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL 硫氰酸标准中间液，用水定容于 10 mL 容量瓶中，浓度分别为 0.1 mg / L、0.2 mg / L、0.5 mg / L、1.0 mg / L、2.0 mg / L。
1.3 仪器工作条件
以 IonPac AS16 阴离子分离柱（4 mm×250 mm）及 IonPac AG16 保护住（4 mm×50 mm）为分析柱，淋洗液采用淋洗液发生器产生的高纯氢氧化钾溶液，流量 1.0 mL / min，外接水模式抑制器抑制模式，抑制器电流 175 mA，柱温：30 ℃，进样量 100 μL。
1.4试验方法
取 5 mL 液体奶样品（固态奶取 1.0 g，加水至 5 mL)，加入 5 mL 乙腈沉淀蛋白，取上清液稀释 10 倍，过 RP 柱去除脂肪后按仪器工作条件上机进行测定。在上述仪器条件下测定标准溶液及样品溶液，并同时测定空白，使用外标法定量。

2 结果与讨论
2.1 蛋白沉淀技术的选择
试验采用乙腈除去液体乳中蛋白质，乙腈能产生细的蛋白沉淀，且沉淀效率高，较适用于高蛋白类样品的分离。本试验通过测试乙腈与液体乳的不同体积比对硫氰酸根回收率的影响，表明增加乙腈比例可以更好地沉淀蛋白，但乙腈比例过高会降低硫氰酸根的回收率，为了更好地分离沉淀蛋白且较好回收效果，乙腈与液体乳的体积比为 5∶5 是较优的选择。
2.2 线性范围和检出限
硫氰酸标准使用液：移取 0.1 mL、0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL 硫氰酸标准中间液，用水定容于 10 mL 容量瓶中，质量浓度分别为0.1 mg / L、0.2 mg / L、0.5 mg / L、1.0 mg / L、2.0 mg / L。将不同质量浓度的标准溶液在上述色谱条件下分别进行测定，进样量为 100 μL。以质量浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标绘制标准曲线。结果表明：在 0.1 mg / L～2.0 mg / L范围内，浓度与其峰面积呈良好的线性关系，回归方程为 y=0.53x,相关系数（r2）为 0.9 996。取标准图谱中一段比较稳定的基线以 3 倍信噪比计算低检出限为 0.1 mg / L。
2.3 方法的精密度和准确度
在液体乳、酸乳、乳粉中按 5mg/kg、10mg/kg、15mg / kg 量加入三聚氰胺标准品，按样品测定方法平行测定 6 次，由测定结果计算回收率和精密度。

来源：惠合胶体磨研磨设备厂

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